内源性抗体类物质,如RF、HAMA和异嗜性抗体等,存在于检测样本中可能会干扰检测过程,导致临床检测结果的错误。为了解决这一问题,建议在检测过程中主动添加适当的阻断剂,以有效消除样本中内源性物质带来的干扰,从而降低假阳性或假阴性的发生率。这将显著提升检测系统的准确性、灵敏度和稳定性,确保分析结果的可靠性。
主动阻断剂含有与干扰抗体具有高亲和力的成分,能够主动与这些干扰抗体结合,从而阻止它们与检测抗体或捕获抗体的结合。另一方面,被动阻断剂通常为动物IgG,通过与检测抗体竞争结合干扰抗体来减少干扰作用,彰显其在较高使用浓度下的竞争能力。此外,复合型阻断剂则使用化学交联技术将单体IgG转化为大分子聚合物,利用空间位阻效应进一步增强阻断效果。
在IgG/RF吸附剂方面,这类吸附剂能够与血清中的IgG形成免疫复合物,借助免疫复合物与变性IgG的相似结构吸附RF,从而显著提高lgM检测的灵敏度和特异性。
关于阻断剂的使用建议,首先,阻断剂的最终工作浓度应通过梯度实验来确定。首次使用时可从较高浓度开始,确认有效后再进行梯度稀释,以选择更合适且经济的使用浓度。第二,使用原则为:尽可能早与样本接触,并尽量延长作用时间。第三,对于免疫侧向层析法,推荐将阻断剂加入标记物垫或样品垫处理液中;对于酶免试剂盒或化学发光试剂盒,建议加入磁珠液或酶标液中;而免疫比浊产品则推荐加入R1工作液中使用。第四,在条件允许的情况下,建议您测试多种阻断剂,选择合适的产品。由于检测目标物和系统的多样性,当单一阻断剂的效果未能完全满足要求时,可以考虑组合使用。有实验结果表明,协同组合能够取得更好的效果。
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