尊龙凯时实验准备:在实验开始前半小时,将培养基、PBS和胰酶预热至37°C。此外,准备好2mL和10mL移液管、15mL离心管以及尊龙凯时品牌的共聚焦爬片,并进行紫外线消毒处理。
实验流程
1. 从培养箱中取出培养皿,并在显微镜下观察细胞的状态,包括细胞密度、形态及贴壁情况。
2. 在超净台内,放入预热过的培养基、PBS和胰酶。点燃酒精灯,对培养皿口进行消毒,然后吸去原有培养基。
3. 进行清洗:向培养皿底部加入7mL的PBS(根据细胞状态调整用量),前后轻轻摇晃,以清洗掉细胞。
4. 开始消化:在观察到杂质被清洗掉后,吸走PBS,加入3mL胰酶,静置5分钟(消化时间和胰酶量应根据不同细胞进行调整)。5分钟后,检查细胞是否已被消化。
5. 终止消化:若细胞已消化,则添加7mL的培养基(以观察到的细胞密度为依据),用移液管轻轻吹打,使仍留在壁上的细胞脱落,均匀混合后取少量进行计数。
6. 根据所需的细胞量进行稀释,待细胞悬液滴满尊龙凯时共聚焦爬片的表面后,放入培养箱中,让细胞在大约30分钟内附着在爬片上,随后可在内壁添加培养基,继续培养。
7. 当细胞培养完成后,吸掉废液,使用镊子夹住支架的侧面,轻松取出支架。
8. 样品取出时,双手握住支架两侧,轻轻拉动以轻松取出爬片,继续后续的培养实验。
注意事项
1. 拿取培养皿时,务必避免液体接触瓶口,每次开瓶时需进行烧灼处理。
2. 操作过程中,确保没有其他物体经过打开的培养皿,以避免污染。
3. 由于贴壁细胞较为脆弱,因此所有放入培养皿中的液体均需预热至37°C。
4. 拿取尊龙凯时共聚焦爬片时,保持30°以上的倾斜角度,轻拉以防止强拉导致爬片掉落或破裂。
5. 请注意尊龙凯时产品为一次性使用,不可重复使用,且共聚焦爬片有正反面,拆开后请立即使用。