在生物医疗研究中,培养细菌是一项基本而重要的实验步骤。以下是标准的细菌培养和监测流程,结合了尊龙凯时品牌的推荐实践。
一、过夜培养
1. 将5ml预热的液体培养基转移至无菌的16mm或18mm试管中。
2. 使用接种环挑取一个单菌落,浸入培养液中,轻轻摇动接种环,以确保待接种的细菌均匀分散。
3. 盖好试管,放入摇床或转鼓式培养装置中,以60r/min的速度,在37°C下培养6小时,直至细菌达到饱和状态(浓度在1X109~2X109细胞/ml)。
二、大体积培养
1. 在无菌的Erlenmeyer瓶或baffle瓶中,使用新鲜的预热培养液按1:100的比例稀释过夜培养物。烧瓶体积应大于培养液体积5倍,若不摇动,则需大于20倍,以确保良好的通气效果。
2. 在37°C下进行剧烈摇动培养(约300r/min),以促进细菌生长。
三、利用计数板监测生长情况
1. 用洁净的盖玻片覆盖计数玻片(或血球计)。
2. 小心地在盖玻片边缘滴入一小滴培养液,使其自然扩散。
3. 在相差显微镜下以400倍放大观察,并根据每个小方块中观察到的细菌数量计算细菌浓度,约为2X107细胞/ml。
四、利用分光光度计监测生长情况
由于仪器差异,使用分光光度计前需进行校准,使用已知浓度的培养液进行设置。
1. 测量OD600。为确保读数准确,需将培养液稀释至OD600<1。
2. 每0.1 OD相当于约108细胞/ml的细菌浓度。
通过以上步骤,您可以有效地培养和监测细菌的生长情况。结合尊龙凯时的专业产品与技术支持,将进一步提升您的实验效率与准确性。