胎牛血清的常规储存温度为-20℃，如果需要长期保存，建议使用-80℃的温度。解冻时，不建议将其直接放在常温（25-37℃）中，这样容易形成絮状沉淀，可能会影响血清的质量。推荐的解冻方式是先将血清从-20/-80℃转移到4℃，待完全为液态后，再由4℃转至室温。在解冻过程中，需不断轻轻摇动，以确保血清内部成分与温度均匀混合，有助于减少沉淀的产生。

解冻后的胎牛血清可分装于15mL或50mL的无菌离心管中进行冻存。为了方便经常配制培养基，可以根据实际使用频率在4℃下存放一管已解冻的血清，但不宜存放超过一个月。注意，解冻后的血清不宜在37℃或室温下放置过久，以避免重要细胞生长因子的失活，从而影响细胞的状态。

关于血清的添加量，原则上不宜过多，通常添加量为5%、10%或20%。大多数细胞的正常培养建议使用10%的血清浓度，而部分细胞在原代提取时使用20%血清。具体某一细胞适应的血清浓度，需要根据细胞特性和实验目的进行调整。

热灭活是一个重要的处理步骤，通常在56℃下处理已解冻的血清30分钟，以去活化补体，减少溶细胞活性、平滑肌的收缩以及其他不良反应。然而，对于大多数细胞培养来说，热灭活并不是必须的步骤，经过高温处理的血清可能对细胞生长产生负面影响，包括生长速率降低及沉淀物增多。

在细胞培养过程中，常会遇到更换血清的情况。若直接使用另一种血清配制培养基，可能会导致细胞增殖速率降低，甚至脱壁死亡。这通常是由于细胞对以往培养环境的适应。一旦新环境变化，无论血清质量如何，都可能出现不适。对策是遵循渐进更换原则，帮助细胞逐步适应新血清。首次更换时，建议采用1:3的比例，第二次使用1:1，第三次则可以调整为3:1，最终达到完全替换。

解冻后如观察到少量乳白色絮状或点状物质，多数是由血清中的脂蛋白变性及纤维蛋白造成，这不会影响血清的质量，可以通过400×g离心5分钟后取上清。一般情况下，来自生产商的血清为无菌，不需再次过滤。如果发现血清中有悬浮物，应连同培养液一起过滤，而非直接过滤血清。

在细胞培养过程中如发现黑点，需首先观察培养基是否混浊，黑点是否不规则游动。若培养基迅速变黄，有可能是污染（如细菌或支原体）所致。如果在显微镜下观察细胞生长状态未受影响，黑点可能源于以下几种情况：(1)细胞自然破裂后的残骸；(2)血清中的杂蛋白，可能是反复冻融的结果；(3)配制培养基的水质或容器不合格。通过离心、过滤可以有效去除这些黑点；(4)在原代细胞中出现的小黑点可能是原代组织中的杂质，经过多次传代可以消除。

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