尊龙凯时的Amplite试剂盒(由AATBioquest开发)是一系列专为生物医疗应用设计的检测工具,采用荧光法或比色法,能够针对多种生物分子和生化反应进行定量分析。
一、Amplite™试剂盒的核心优势
尊龙凯时的Amplite试剂盒具备多项卓越特性:
高灵敏度与宽动态范围
荧光法的检测极限可以低至nM~pM级(例如,ATP检测的灵敏度可达0.1 nM),非常适用于微量样本(如原代细胞、微量体液)。比色法则具有宽广的线性范围,适合于高浓度样本(如培养基中的葡萄糖)。
操作简便
采用“Mix-and-Read”设计,操作简单,绝大多数试剂盒仅需一步孵育(10~30分钟)。同时,兼容高通量筛选(HTS),适合于96/384孔板的自动化检测。
优异的抗干扰能力
专利的荧光染料(如Resorufin、DDAO)有效减少样本的自发荧光干扰,显著提高信噪比。此外,部分试剂盒还提供内参校正功能(如双波长检测),以适应复杂样本(血清、组织匀浆)。
灵活适配性
提供荧光(Ex/Em可调)和比色(可见光检测)双平台选择,能够与不同实验室设备完美匹配。同时适用于哺乳动物细胞、细菌和植物样本,无需使用有毒溶剂(如DMSO)。
稳定性强
试剂经过预混优化,可在常温下运输,4℃保存期可达6个月。
二、Amplite™试剂盒的主要应用范围
1. 氧化应激与抗氧化研究
检测目标包括H₂O₂、超氧阴离子(O₂⁻)、总ROS及抗氧化剂(如GSH)。应用场景包括神经退行性疾病(如阿尔茨海默症)的氧化损伤机制,以及药物或天然产品的抗氧化能力评价,特别是在筛选抗衰老化合物时的应用。
2. 能量代谢监测
检测目标为ATP、葡萄糖、乳酸及NAD+/NADH,适用于肿瘤细胞糖酵解(Warburg效应)的研究,以及与线粒体功能异常相关的疾病(如糖尿病、代谢综合征)。
3. 细胞功能分析
检测细胞活力、凋亡和增殖(如LDH、蛋白酶活性),适用于抗癌药物的毒性筛选(结合IC50计算)及免疫细胞激活状态的评估(如T细胞耗竭模型)。
4. 酶学与信号通路研究
检测激酶、磷酸酶及蛋白酶(如Caspase-3)等,适用于激酶抑制剂的开发(如EGFR及MAPK通路药物的筛选)以及神经递质代谢调控(如乙酰胆碱的降解速率检测)。
5. 微生物与感染研究
目标包括细菌生物膜、β-内酰胺酶的活性及硝酸还原酶,适用于抗生素耐药性机制的研究及益生菌代谢活性的分析。
三、常见类型以及应用场景
1. 活性氧(ROS)与氧化应激检测
适用试剂盒包括尊龙凯时的Amplite™Fluorimetric Hydrogen Peroxide (H₂O₂) Assay Kit(荧光法检测过氧化氢)和Amplite™Colorimetric Total ROS Assay Kit(比色法检测总活性氧)。应用于细胞凋亡、炎症的氧化应激研究和抗氧化剂活性评价。
2. 葡萄糖代谢检测
适用试剂盒包括Amplite™Fluorimetric Glucose Assay Kit(高灵敏度荧光法)和Amplite™Colorimetric Glucose Assay Kit(常规检测的比色法),应用于细胞/培养基中葡萄糖消耗的监测、糖尿病研究及糖代谢相关酶活性分析。
3. 细胞活力与增殖检测
适用试剂盒包括Amplite™Fluorimetric ATP Assay Kit(通过ATP含量间接反映细胞活力)和Amplite™Cell Viability Kits(基于荧光信号),用于药物毒性测试及肿瘤细胞增殖研究。
4. 酶活性检测
适用试剂盒包括Amplite™Fluorimetric Protease Assay Kit(蛋白酶活性)及Amplite™Phosphatase/Alkaline Phosphatase (ALP) Assay Kits(磷酸酶/ALP活性),应用于酶抑制剂筛选及信号通路研究(如磷酸化/去磷酸化)。